紫外可見分光光度計(jì)是基于紫外可見分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進(jìn)行分析的一種分析儀器。以下是對(duì)紫外可見分光光度計(jì)的詳細(xì)介紹:
一、基本原理
吸收光譜:分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其特別的、固定的吸收光譜曲線。
定性與定量分析:根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
Lambert-Beer定律:A=εbc,(A為吸光度,ε為摩爾吸光系數(shù),b為液池厚度,c為溶液濃度)。即物質(zhì)在一定濃度下的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度成正比。基于該定律,可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析。
二、主要構(gòu)造
光源:提供足夠強(qiáng)度的、穩(wěn)定的連續(xù)光譜。紫外光區(qū)通常用氫燈或氘燈,可見光區(qū)通常用鎢燈或鹵鎢燈。
單色器:將光源發(fā)出的復(fù)合光分解并從中分出所需波長的單色光。色散元件有棱鏡和光柵兩種,它是分光光度計(jì)的心臟部分。
吸收池:又稱比色皿,供盛放試液進(jìn)行吸光度測(cè)量之用??梢姽鈪^(qū)的測(cè)量用玻璃吸收池,紫外光區(qū)的測(cè)量須用石英吸收池。
檢測(cè)器:通過光電轉(zhuǎn)換元件檢測(cè)透過光的強(qiáng)度,將光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)。常用的光電轉(zhuǎn)換元件有光電管、光電倍增管及光二極管陣列檢測(cè)器。
信號(hào)顯示系統(tǒng):將檢測(cè)器輸出的信號(hào)放大并顯示出來。
三、分類
按光路系統(tǒng):可分為單光束和雙光束分光光度計(jì)。
按測(cè)量方式:可分為單波長和雙波長分光光度計(jì)。
按繪制光譜圖的檢測(cè)方式:可分為分光掃描檢測(cè)與二極管陣列全譜檢測(cè)。
四、主要應(yīng)用
定量分析:廣泛用于各種物料中微量、超微量和常量的無機(jī)和有機(jī)物質(zhì)的測(cè)定。
定性和結(jié)構(gòu)分析:紫外吸收光譜還可用于推斷空間阻礙效應(yīng)、氫鍵的強(qiáng)度、互變異構(gòu)、幾何異構(gòu)現(xiàn)象等。
反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究:研究反應(yīng)物濃度隨時(shí)間而變化的函數(shù)關(guān)系,測(cè)定反應(yīng)速度和反應(yīng)級(jí)數(shù),探討反應(yīng)機(jī)理。
溶液平衡的研究:如測(cè)定絡(luò)合物的組成、穩(wěn)定常數(shù)、酸堿離解常數(shù)等。